Per realitzar aquesta pràctica hem hagut d'utilitzar dues sessions de laboratori. Això és degut a que l'extracció i observació de l'ADN l'havíem de fer sobre dos tipus de teixits: animals i vegetals.
Amb el material adient, a més del fetge de pollastre i la fruita, el procediment que vam seguir va ser el següent:
Primer, en el cas del fetge, el vam haver de triturar i afegir sorra amb la finalitat de que es trencaren les membranes i poder accedir al nucli. Fins que tot formés una pasta, vam afegir aigua de l'aixeta al triturat. En el cas de la maduixa i el kiwi, ambdós vam xafar-los amb les mans fins que es formés una massa uniforme a la que més endavant afegiríem 10 ml. de solució d'extracció.
 |
Triturat amb aigua afegida (fetge) |
En segon lloc, vam filtrar el "puré" que havia format el fetge amb una gasa i, amb l'objectiu de trencar els nuclis per alliberar les fibres de cromatina, vam agregar el mateix volum de Nacl en solució a l' 11%. Després vam posar detergent diluït per separar les histones de les fibres de la cromatina, ja alliberades dels nuclis. Pel que fa a la massa de les peces de fruita, vam filtrar-la també (aquest cop amb l'ajuda de paper de filtre).
 |
Imatge de la filtració amb gasa (fetge) |
 |
Filtració amb paper de filtre (kiwi) |
En tercer lloc, als dos vasos de precipitats on tenim els triturats de les dues parts de la pràctica, vam afegir menys de 50 ml. d'alcohol 96º. D'aquesta manera es formen dues capes i precipitaran les fibres d'ADN. En el cas dels teixits vegetals, vam afegir alcohol a una temperatura molt baixa per protegir els filaments d'enzims i perquè precipiti amb més facilitat.
 |
Triturat amb alcohol afegit, fibres d'ADN precipitant. |
Per últim, vam extreure les fibres amb les que vam preparar les observacions per poder-les examinar i analitzar al microscopi.
 |
Fibres extretes després de precipitar en alcohol. |
Nuria García Sáez 4tB